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司空見慣未必真了解:移液器的正確使用與日常維護

點擊次數:2844  更新時間:2021-07-20

/// 移液器的正確使用與維護,保證精確移液的日常操作!

實驗室天天見的移液器,握在手里時那熟悉的觸感,加液移液時一氣呵成的操作,這個feel簡直了,就是科研咖們的“倍爽兒"!越是最司空見慣的東西,未必就是我們最了解的。看似簡單的移液器,卻是陪伴科研咖們實驗生涯最久的伴侶,值得我們去學習如何正確使用和保養它,才可維持住這一份實驗室的“長情"!


1 移液器正確使用

01 量程調節


量程的設定原則:由大到小!

  • 1)當由小量程到大量程時:

  • 2)朝所需量程方向連貫旋轉

  • 3)旋轉到達超過所需量程1/3圈處

  • 4)回調到所需量程處

Tips:正確的量程設定可以提高0.5%的移液準確性!IKA移液器具有量程安全鎖,待調節到所需體積后,按下量程安全鎖,體積即被鎖定,在移液過程中可以有效防止量程“漂移"。

02 安裝吸頭

正確操作:
移液器套柄用力下壓并小幅度旋轉即可

錯誤操作:
用力敲擊吸頭。(此方法會帶來吸頭損壞甚至移液器套柄磨損,從而影響其密封性)

Tips:規范的移液操作可能帶來0.1%到5%的移液誤差,甚至更高!

03 潤洗吸頭


用同一樣品對吸頭進行潤洗
先吸取樣品,然后排回樣品池或廢液槽
潤洗有助于提高吸頭多次相同移液操作的一致性
注意:高溫或低溫液體不要潤洗吸頭!

Tips:潤洗吸頭可提高0.5%的移液準確性!

04 吸液的正確操作

保持平順,控制好吸液速度
過快的吸液速度,會導致:

  • 1)樣品液進入套柄

  • 2)對活塞和密封圈造成損傷

  • 3)帶入氣霧

  • 4)造成樣品交叉污染


Tips:不正確的吸液速度會導致至少5%的準確性下降! IKA 移液器的機身重量很輕,適合于長時的移液操作。對于分相液體需要吸取特定層的樣品時,必須控制好手速,緩慢釋放移液軸,避免吸取到非特定層的物質。

05 吸液的正確姿勢

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                                                                            正確的吸頭浸入角度

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                                                                             錯誤的吸頭浸入角度

Tips:以正確角度進行吸液操作可提高0.5%的移液準確性 (微量程移液器可達 2.5%)

06 排液

先將排液按鈕按至第一檔(排液檔),略作停頓以后,再按至第二檔(吹液檔)
常規排液操作:

  • 1)沿容器內壁排液(常規)

  • 2)直接排入液面下

  • 3)在液面上方排液


Tips:正確的排液技術提高1%的移液準確性!

07 高黏及易產生氣泡樣品的移液策略

反向移液技術:
將排液按鈕按至第二檔
將吸頭浸入液面至少1mm,吸取液體
排出液體時,將排液按鈕按至第一檔
殘存在吸頭內的液體可以排出到原瓶或者棄掉


2 移液器的日常維護

01 移液器歸位

當天用完應調回最大量程,放置于移液器支架或實驗臺掛鉤上。

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02 移液器的清潔

A. 外部清潔
移液器外殼清潔,可先用日常清潔劑(肥皂液,洗潔精等)擦洗,然后用雙蒸水擦凈晾干即可。

B. 內部清潔
移液器內部清潔,先將移液器下半部分拆卸下來,其中塑料部件采用與外部清潔一致的方式即可;活塞清潔可用雙蒸水(或先用異丙醇沖洗再用雙蒸水洗凈),晾干即可(需要涂密封油脂的移液器還需要涂上密封油脂)。

Tips:移液器槍體密封部分,大多是免維護的,不能輕易拆卸。

03 移液器的消毒滅菌

A. 常規的高溫高壓滅菌處理
用滅菌袋或牛皮紙等材料包裝移液器滅菌部件,121°C,1BAR,20分鐘,滅菌完畢室溫下*晾干后再組裝。

B. UV紫外照射進行表面滅菌消毒
Tips:IKA的移液器允許整支消毒滅菌。實驗者也可徒手拆卸開移液器的下半部分進行部分消毒滅菌的處理。

04 移液器的氣密性檢查

絕大部分移液器不準是由于移液器漏氣造成,造成移液器漏氣的原因很多,像吸頭質量、吸頭匹配性、吸頭安裝是否緊密、移液器本身漏氣等。當懷疑移液器本身漏氣時,可通過以下方法進行檢查:

A. 簡單目視檢測法(適合用戶自行檢測)
取一個透明的容器,裝上水,將需要測試的移液器裝上吸頭,吸上水。
如果是200ul以下的移液器,請將吸頭浸入液面1-2毫米,靜待20秒,觀察吸頭內部液面是否下降,如果下降了,就說明您手中的移液器出現了漏氣的情況;
如果是1000ul以上的移液器,請將吸頭朝下懸垂20秒,觀察是否有液體下滴,如果有,說明您手中的移液器也出現了漏氣的情況 

Tips:如移液器本身密封性不好,需更換活塞或密封圈。

B. 專業壓力泵檢測
需使用專業壓力泵進行檢測。
 

05 移液器校準

需要在特定的環境條件(溫度、濕度等)及具備相應硬件(如高精密度的天平)的實驗室中進行,客戶一般只能粗略進行自測(IKA的移液器上有一個校調按鈕,若發現量程不準,可人工按下此按鈕,進行移液器校調)。需嚴格校準則需由廠家進行校準。
Tips:IKA 可為購買IKA移液器的客戶提供校準服務(收費項目),出具符合CNAS要求的校準報告。




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